1實驗部分

1.1儀器和試劑

1290 HPLC-Bruker Maxis Q-TOF型高效液相色譜-高分辨串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（HPLC-MS/MS，美國Agilent公司）；LC-WB-4型磁力攪拌水浴鍋（上海力辰邦西儀器科技有限公司）；JZ-200A型自動界面張力儀（芬蘭Kibron公司）；Foamscan型全自動泡沫分析儀（法國Teclis公司）。

SLs產(chǎn)品：野生型菌株生產(chǎn)的SLs產(chǎn)品是以葡萄糖和油酸為底物，經(jīng)發(fā)酵后自然沉淀得到系列同系物，大部分具有乙酰基，簡稱為“乙酰化SLs”；去乙酰化菌株生產(chǎn)的SLs產(chǎn)品是以葡萄糖和油酸為底物，經(jīng)發(fā)酵后使用乙醇萃取，在55℃減壓去除乙醇溶劑后得到，簡稱為“去乙酰化SLs”。

乙酸乙酯、無水乙醇、硫酸、甲酸、無水碳酸鈉、連二硫酸鈉、無水氯化鈣、氯化鈉和液體石蠟均為分析純試劑，氫氧化鈉和硫化鈉為化學(xué)純試劑，以上試劑均購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；松節(jié)油和棉籽油為分析純試劑，購自上海邁瑞爾生化科技有限公司。

1.2乙酰化SLs和去乙酰化SLs同系物的結(jié)構(gòu)鑒定

HPLC-MS/MS的色譜柱為Waters ACQUITY UPLC BEH130 C18 2.1 mm×150 mm×1.7μm。實驗條件：流動相A：0.1%甲酸、1%乙腈水溶液；流動相B：0.1%甲酸乙腈；流速為0.2 mL/min；等度洗脫條件為：80%B。柱溫：30℃，進(jìn)樣量：1μL，UV檢測波長：207 nm，無分流進(jìn)入質(zhì)譜。質(zhì)譜：電噴霧正離子模式；掃描范圍m/z 200~1000；毛細(xì)管電壓：4.5 kV；噴霧氣壓1.03×104 Pa；干燥氣（N2）流速：6 L/min；氣體溫度：180℃；分辨率：50000。

1.3理化性能測試方法

1.3.1溶解性、濁點和耐酸堿性

溶解度測定：量取100 mL去離子水于燒杯中，逐步加入溶質(zhì)其中至恰好飽和，計算濃度。濁點的測定參考GB/T 5559-2010。耐酸堿性檢測方法參考GB/T 5555-2003和GB/T 5556-2003，抗硬水性測試參考GB/T 7381-2010。

1.3.2表面性能

通過鉑環(huán)法在室溫下進(jìn)行表面張力測定，參考GB/T 5549-2010。繪制出表面張力-濃度對數(shù)（γ-lg c）曲線。使用公式（1）和（2）對飽和吸附量（Гmax）和單個分子占據(jù)最小表面積（Amin）進(jìn)行計算。

式中，Гmax是飽和吸附量（μmol/m2）；γ為表面張力（mN/m）；R為摩爾氣體常數(shù)（8.314 J/（mol·K））；T為熱力學(xué)溫度（K）；ρ為表面活性劑的質(zhì)量濃度（mg/L）；（?γ/?logρ）T是表面張力與濃度對數(shù)關(guān)系曲線的斜率；Amin是單個分子占有的最小表面積（nm2）；NA為阿伏伽德羅常數(shù)（6.022×1023/mol）。

1.3.3親水-親油平衡值

采用乳化法來測定HLB值，即通過觀測樣品對確定HLB值的混合植物油的乳化穩(wěn)定性來評價樣品的HLB值。具體方法為：使用松節(jié)油（HLB值為16）和棉籽油（HLB值為6）配制一系列不同HLB值的油相，每19份油相中加入80份水和1份待測樣品，攪拌乳化，穩(wěn)定10 min后讀取乳化層高度，乳化層高度最高的試樣中對應(yīng)油相的HLB值即為待測試樣的HLB值。

1.3.4泡沫性能

使用泡沫分析儀通過多孔介質(zhì)向400 mL待測液體（1 g/L）內(nèi)注入氣體而產(chǎn)生泡沫，記錄2種SLs起泡后穩(wěn)定30 s和5 min的泡沫量，使用公式（3）計算2種SLs的泡沫穩(wěn)定性：

式中，Sfoam為泡沫穩(wěn)定性，V5 min為靜置5 min后的泡沫體積（mL），V30 s為靜置30 s后的泡沫體積（mL）。為了對比分析SLs在不同鹽度（S）下的泡沫性能，在氯化鈉質(zhì)量濃度為0、10、100、200、400、600、800和1000 mg/L的溶液中測定30 s泡沫量，方法同上。

1.3.5乳化性能

取40 mL待測溶液（1 g/L）、40 mL液體石蠟，加入到100 mL具塞量筒中，劇烈搖動后開始計時，記錄分出10 mL水相所用時間。